ELISA试剂盒的制备和结构检测
2023-04-24
ELISA试剂盒是一种常用于检测生物分子（如蛋白质、抗体等）的分析工具。其制备和结构检测通常包括以下步骤：
制备步骤：
1.表面涂层：将需要检测的分子（如蛋白质、抗原等）固定在微孔板（plate）的表面上，一般使用化学交联或物理吸附等方法实现。
2.阻断：用一些不与被检测分子反应的蛋白质（如牛血清白蛋白、干酪蛋白等）来阻断微孔板上未被固定的表面，避免后续的假阳性结果。
3.加入抗体：加入一种特异性抗体，与被检测分子结合。
4.加入检测物：通常是酶标记的二抗或其他蛋白质，可以与抗体结合，形成信号。
5.加入底物：底物与酶结合，可以被测量（如颜色变化等）。
6.检测：测量样品中的信号，以此来确定被检测分子的存在或浓度。
结构检测步骤：
1.
SDS-PAGE：使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对试剂盒中的蛋白质进行分离和纯化，以确保试剂盒中所含蛋白质的纯度和相对分子质量。
2.Western blotting：将SDS-PAGE中分离的蛋白质转移到膜上，使用特异性抗体检测试剂盒中的蛋白质，以确定试剂盒中是否含有正确的蛋白质。
3.HPLC：使用高效液相色谱（HPLC）等方法对试剂盒中的小分子化合物进行分离和纯化，以确保试剂盒中所含化合物的纯度和含量。
公司动态