细胞老化的征兆具体有一下这几点:胞周期阻滞、细胞形态改变。
1、细胞周期阻滞:
长期的细胞周期阻滞是老化细胞的基本特征,也是体外鉴定细胞老化不可或缺的指标。为了检查细胞是否跃出了细胞周期,人们通常检测增殖指示分子Ki-67的表达丰度;或者通过将与胸腺嘧啶相似的溴脱氧尿嘧啶(Bromodeoxyuridine,BrdU)掺入到细胞培养基中,观察是否有新的DNA合成。细胞老化主要表现为G1期阻滞,个别情况下也可伴随G2/M期周期阻滞,或直接由G2/M期阻滞诱发形成。
2、细胞形态改变:
虽然由于细胞周期的中断和DNA复制的停止,老化细胞内的DNA含量与正常细胞类似,但 RNA与蛋白质丰度均比正常细胞要明显升高。这是因为,尽管细胞进入老化阶段后蛋白质的整体合成速率降低,但是蛋白质的降解体系受到更加明显的抑制,导致蛋白质在细胞内持续堆积。但,由于不同组织来源的细胞,其形态本就各不相同,因此,目前还并无客观的、统一的标准从细胞形态判断并定义老化细胞。换句话说,目前并不能直接根据细胞的形态去判断是否老化细胞。
无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞老化现象是存在且常见的,但却容易被操作人员忽略,老化的细胞会出现的特征包括:细胞增殖变慢、细胞核体积异常及多核(4-8核)、表面分泌物增多、细胞体积增大、细胞扁平、细胞质中出现空泡等现象。