用途:科研实验专用,不得用于临床诊断,请按说明书严格操作
规格:96T/48T
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)水平。用纯化的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1),再与HRP标记的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化
成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)呈正相关。用酶标仪
在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)浓度。
需要而未提供的试剂和器材:
37℃恒温箱。
标准规格酶标仪。
精密移液器及一次性吸头
蒸馏水,
一次性试管
吸水纸
标本要求 :
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最-好控
制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最-好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于
标准品孔第-一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍) 后再测定,计算时请最-
后乘以总稀释倍数(xnx5)
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。